チャネルロドプシン発現神経節細胞の形態学的分類による視機能シミュレーション
Project/Area Number |
22591962
|
Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
|
Allocation Type | Single-year Grants |
Section | 一般 |
Research Field |
Ophthalmology
|
Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
渡部 眞三 東北大学, 学内共同利用施設等, その他 (10093486)
|
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
富田 浩史 東北大学, 国際高等研究教育機構, 准教授 (40302088)
菅野 江里子 東北大学, 国際高等研究教育機構, 助教 (70375210)
砂金 ひとみ 東北大学, 国際高等研究教育機構, 技術補佐員 (30400451)
|
Project Period (FY) |
2010-04-01 – 2013-03-31
|
Project Status |
Declined (Fiscal Year 2012)
|
Budget Amount *help |
¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2012: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2011: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2010: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
|
Keywords | チャネルロドプシン / 網膜 / 視覚野 / 網膜色素変性症 / 神経節細胞 / アデノ随伴ウイルスベクター / 遺伝子治療 / チャネルロドプシン-2 / 網膜神経節細胞 / 視覚再生 |
Research Abstract |
緑藻類クラミドモナスが持つ光受容タンパク質「チャネルロドプシンー2(ChR2)」は、光受容能と陽イオン選択的チャネルとしての機能を有し、神経細胞に遺伝子導入することによって、光受容能を賦与することができる。この特徴的な機能を利用することで、遺伝盲ラットの視機能を獲得することに成功している。この方法では、視細胞が消失した網膜の神経節細胞(RGC)にChR2を導入することによって、RGCに光受容能を与える。RGCには、役割の異なる数タイプが存在することから、アデノ随伴ウイルスベクター(AAV)を用いた遺伝子導入によって、ChR2が発現されたRGCのタイプを調べることは、回復される視機能をシミュレートするのに有用である。ラット網膜への遺伝子導入では、投与するウイルスベクターの濃度に依存して、導入される細胞が異なることが示されている。濃度の減少に伴って小サイズの神経節細胞には導入されず、大型の神経節細胞に限定されることが明らかとなった。 今回、カニクイザルを用いて、アデノ随伴ウイルスベクターによる網膜神経節細胞への導入効率を調べた。アデノ随伴ウイルスベクターを硝子体内に投与し、遺伝子の発現を網膜進展標本を作製し調べたところ、遺伝子発現は確認されなかった。その原因が硝子体にあると考え、硝子体を酵素的に融解し、遺伝子導入を行うことを試みた。硝子体を融解後、アデノ随伴ウイルスベクターを投与したところ、網膜神経節細胞での遺伝子の発現を確認することができた。ラットでの研究と同様に、大型の神経節細胞に発現が見られた。しかし、遺伝子導入効率は、ラット網膜への遺伝子導入と異なり、遥かに低いものであった。
|
Report
(2 results)
Research Products
(28 results)
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
[Presentation] Visual Responses of Royal College of Surgeons Rats Transferred Modified Volvox Channelrhodopsin-2 Gerie.2010
Author(s)
Tomita, H., Sugano, E., Isago, H., Hiroi, T, Wimg, Z., Tamai, M.
Organizer
Annual meeting Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO)
Place of Presentation
Ft. Lauderdale, US
Year and Date
2010-05-02
Related Report
-
[Presentation] Systematic and Local Responses of Channelrhodopsin-2 Gene Therapy2010
Author(s)
Sugano, E., Tomita, H., Isago, H., Hiroi, T, Wang, Z., Tamai, M.
Organizer
Annual meeting Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO)
Place of Presentation
Ft Lauderdale, US
Year and Date
2010-05-02
Related Report
-
[Presentation] Retinal and systemic immune responses after the transfer of channel-rhodopsin-2 into RCS rats2010
Author(s)
Tomita, H., Sugano, E., Isago, H., Hiroi, T, Wang, Z., Tamai, M.
Organizer
XIVth International Symposium on Retinal Dege neration
Place of Presentation
Quebec, Canada
Related Report
-
[Presentation] Optimization of volvox-derived channelrhodopsin-1 to expression in mammalian cells2010
Author(s)
Sugano, E, Tomita, H, Isago, H, Hiroi, T, Wang, Z., Tamai, M.
Organizer
XIVth International Symposium on Retinal Degeneration
Place of Presentation
Quebec, Canada
Related Report
-
-